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随着科研的深入、课题的进展，我们会从商家购买质粒菌种订购引物，我们自己也会构建许许多多的克隆载体。几乎实验室所有人都会产生很多冻存菌、引物及质粒。那么如何保存以及管理这么多的实验产物呢？
图片来源网络
很多人一定见过上面的白色冻存盒，对于条件好点的实验室其使用的冻存盒可能更高档。一般冻存盒都是9*9格的，可以先对盒子进行编号，1，2，3...等，再对每个盒子内部每小格进行编号，如A1,A2,B1...等。这个任何一个盒子的任意一格都有了唯一的编号对应，如3C8，指的是第三号盒子的C8格。
建立好编号之后，再在标准的Excel表格中，建立起位置和冻存物的对应关系。还应记录下冻存菌/引物/质粒的信息(如名称，序号，状态，冻存时间等)。填写好相关信息后，再将冻存菌/引物/质粒放于冻存盒的预定位置，保存到合适温度的冰箱或液氮罐中。这样大家就可以有条不紊的管理自己的“小金库”了，下面我们针对不同类型的冻存物，具体看看其保存方法。
一、甘油冻存菌的保存与复苏
按照菌种类型(如DH5α或者表达菌)的不同，分盒保存。冻存盒中的冻存管，可按冻存时间排列。冻存菌保存在-80℃冰箱或液氮罐中。
50%（v/v）灭菌甘油
2 mL 无菌冻存管
1 mL已灭菌的枪头
无菌接种环或灭菌枪头，含有合〗适抗生素或无抗的LB板
>>> 甘油菌的冻存：
一般保种用的菌液要求浓一些，因此培养时间可以比平『时长一些，一般过夜即可;
在无菌操作条件下，分别向已灭菌的2mL冻存管中，加入500uL菌液和500uL?50%甘油溶液，轻轻混匀，务必充分混匀;
?甘油冻存菌可以直接保存在-80℃中，有时为了减少菌体因冰晶形成而死亡，也会使用液氮速冻之后在放到-80℃冰箱保存。该冻存菌可在此条件下保存数年之久。随后的冻存和融化操作将会减少保存年限。
（注意：与菌液接触的物品，如枪头、冻存管、50%甘油溶液均需要处于无菌状态，并保证操作在无菌条件下进行。）
>>> 甘油菌的复苏：
从甘油冻存菌中复苏细菌，在无菌条件下，打开盖子，使用无菌接种环或灭菌枪头从冻存管中刮取适量冻存菌，划线接种到LB板（含有合适抗生素或无抗）上。操作应适当快一些，以减少冻存管内的融化。
在合适的温度条件下，将划线接种的⌒ LB板进行过夜培养。过夜培养后，挑取单个克隆进行后续操作。
（注意：所有东西准备完全后，再去-80℃冰箱取出保种菌，划线动作要快，时间拖得太长会融化冻存菌，而这导致保种菌死亡。）
参考链接：http://www.addgene.org/recipient-instructions/create-glycerol-stock/
二、引物保存
按照用途，引物分为PCR引物，测序引物。而按照存在状态，引物则分为干粉/薄膜状态、100 uM稀释状态、10 uM稀释状态（10 uM为PCR的通常使用浓度）等三种状态。
1.5 mL EP管
无菌蒸馏水
引物一般有两管（均为干粉状态），其中一管可直接保存，而另外一管可稀释其中引物的浓度至10uM（使用浓度）。两管放置可在同一个冻存盒中的相邻位置，按引物序号排列。
PCR引物则根据引物的浓度不同（一般只有100uM和10uM两种）进行分盒保存。在每一个冻存盒中，按照引物序号依次排列。引物保存在-20℃冰箱中。
>> 引物稀释：
先将装有引物的EP管进行离心，12000g 离心1 分钟，将干粉或薄膜状态的引物离心至管底。然后，根据引物管上指示的体积，加入对应量的无菌蒸馏水，使用枪头吹打混匀，即可得到浓度为100uM的引物。对其进行10倍稀释，即可得到浓度为10uM的引物。
三、质粒保存
按照用途，质粒一般分为PCR模◢板型质粒（用于扩增目的基因片段）和蛋白表达型质粒（用于表达目的蛋白）。可按照用途的不同，分盒保存。经常使用的质粒可以保存在-20℃冰箱中，长期保存建议放在-80℃冰箱。
对于新构建的质粒或者购买回来的载体，建议测序正确后再多提几管，放在-80℃冰箱保存。
此外，还可以将质粒转入合适的感受态菌株中，通过保存菌种的方法达到保存质粒的目的。
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