作者及其◣单位：段英飞（西安交通大学第一附属医院病理科，男，主管技师）、赵凌云（西安肾病中心），翁改志（西安交通大学医院检验科）

近年来，随着现代化先进仪器在医院病理科的广泛应用以及病理技术人员素质的提高，病理技术室的科学化管理体系正在建立▼和完善。管理体系建立的目的是使工作流程规范化、操作标准化，从而避〇免主观不利因素的影响，以获得优良、可靠的病理切片，为高水平的病理诊断做好基础。病理技术常规工作的各环节是相互关联的有机组合，每一环节的失控都可以造成制片的质量问题。因此，质控●和管理工作就涉及到制片工作的←每一步骤，必须有具体的质量标准和管理措施，还要实施必要的监督。

1、临床病理技术室出片前工作流程中的问题与改进措施

1．1 取材前的准备工作

1．1．1 标本固定 固定是病理技术工作中至关重要的环节，也是首要环】节。常用10％中性福尔马林作为固定液。标本除了本院各科室外还涉及到外院术后送检的ξ标本，固定不佳现象较常见。针对此现象，我们采取以下措施，并取得显著效果。(1)组织一旦离体必须ぷ及时固定，一般固定液的量应为组织体积的10倍以上，大标本不♀少于总体积8倍。(2)通过医院例╳会、科室宣传栏等方式，加大标本固定的宣传力度，使︽送检标本固定合格。(3)由医师和技术员组成标本预处理小组，做到较大标本沿最大的剖面切开、空腔脏器应剪开，注意组织块★不要与容器壁紧贴，手术标本√最好固定12 h后再取材；淋巴组织外围包有一层致密被膜，试剂难以渗『透到组织内部，虽然皮质部细胞被固定，但髓质的淋巴细胞自溶尚在继续进行，因此，淋巴结活检组织一经切除，，以充分固定。(4)在◤病理科标本取材室内准备带盖子的大桶，配好常用固定液，对送检固定不佳的标本进行再固定。实∮践中发现所配福尔马林液中甲醛浓度为15％～18％效果最佳，这可能与国★内甲醛试剂本身品质、使用时的挥发和操作时放拿标本带入水分等因素有关。

1．1．2 标本接收 (1)受检标本进入病理科的第一关就是标本接收，接收工作必须认真、细致。申请单内容填写不全或不规范是最常见的现象㊣。因此，接收标本时要依据送检单■，注意要求和目的，并仔细检查送检物与送检单是否相符，若存在问题╲要及时和送检科室或单位联系，标本符合要求后接收者和送检者双方签字确认。对于不符合送检要求的标本要拒收，这点非常重要，绝不可〗忽视。(2)建立标本接收登记制度，特别对送检不合格病理←标本要重点标注并记录处理意见≡。

1．2 取材组织块的规范性要求

1．2．1 规范化取材 在日常工作中，大量实践证明，取材是否规范直接影响组织处理的成败及切片制作的质量。(1)要求组⊙织大小合适、厚薄均匀、形态规则。常规以不△大于37.5px×25px、厚0.2-7.5px为宜，取材过大、过厚会造成脱水不彻底，处理不佳，形成“生心儿”现象，影响切片质量；形状不规整，影响出片的美观和艺术性。为此，我们在取材者正对取材台内壁位置处张贴取材规范示意图，图中包◎含常用取材手法、组织块标准大小和多种组织块形状规范等，做到对不同取材者(包括本⊙科医师、进修医师和实习医师等人员)不但取材要求标准统一，且可时时提醒，收到了良好效果。(2)对于一些特殊性组织取材，应区别对待，如骨组织的脱钙处＠ 理；甲状腺、血块等易＠发脆组织可适当取厚点，以厚度≤0.5 cm为宜；子宫肌瘤、纤维性肿瘤等致密组织和脂肪试剂不易渗入者应取薄些。

1．2．2 注意事项 标本篮内标本盒排卐列不要过于紧密，否则将影响脱水剂与组织块的相互作用造成脱水不充分。

1．3 组织块的处理

1．3．1 综合预防是关々键 (1)常规工作中，组织的处理包括：脱水、透明和浸蜡三〓步。脱水是否彻底关系到组织能否充＠ 分透明，而组织透明程度直接影响到组织浸蜡的效果。(2)组织处理不佳，往往是综◤合因素所致而非某一方面的原因造成。如组织块处理后包埋时手感发软，是脱水不↘彻底、蜡不能有效进入组织而使其获◣得一定的硬度所致，应该从检查脱水机中的试剂浓度、调整组织处理时间、查看组织处理缸的温度、检查蜡温等方面综合考虑来解决问题。因此，组织块处理要获得最佳效果，提前综合预防是关键。

1．3．2 预防处理方法≡及注意事项 (1)保证各级乙醇的浓度是关键。试剂的更换要依处▲理的组织量为基础，根据经验：试剂500ml乙醇，每处理6OO～700个组织块↘更换1次。(2)组织脱水时间与温度密切相关。冬天温度低，脱水时间可适当延ㄨ长；夏天温度相对较高，可适当缩短。在组织脱水处理过程中，要注意▃低浓度乙醇与高浓度乙醇的相互关系。通常低〇浓度乙醇比高浓度乙醇更易渗透到组织内使之脱水，若组织在低浓度乙醇中充分脱水，则在无水乙醇中不超过1h为宜。特别要注意组织在高浓度乙醇中处理时间过久会造成组织发干发硬，以致制片困难。(3)二甲№苯透明时温度不能超过35℃、时间不超过12h，否则极易引起组织发酥发脆而不能制片。(4)浸腊々温度应不超过60℃，石蜡的熔点以56～58℃为佳。超过60℃，组织内的抗原易受到较大破坏。需要特别注意的是第一道浸腊液中二甲苯的含量，过多的二甲苯在较高温度下极易使组织发干发脆，造成切片困ξ　难，因此第一道蜡要经常▲更换。(5)包埋的原则：一是方位正确，二是〖最大面包埋。囊壁和管腔等组织要立起来包埋，变形的组织块要用镊子轻压组织块变形部分，使之平贴于包埋盒底部以最大面包埋。胃黏膜、胸穿等碎小组织包埋应尽♀量做到同一平面上集中包埋。此外，包埋时发现的线头、纸絮和◇骨渣、钙化点等必须去掉。

1．4 切片

1．4．1 切片中常见问题的原因和处理的方法 (1)切片厚薄不均：切片⌒　的厚度一般与操作者应用切片机的手法密切相关，切片速度不均、切片刀不够锋利、组织块『较硬、组织蜡块固定松动等因素都会造成切片厚薄不一。只有切片时用力■均匀、柔和，摇速适当且切片刀十分锋利，才能保证厚度均匀。(2)组织发干发脆：与组织本身质地〓(如血块、甲状细等)和脱水、透明、浸∮蜡温度过高、时间过长有关。切片时，边切∩边用手指蘸温水轻扶蜡块表面或用嘴①向蜡块哈气，效果会好很多。(3)组织发软、发白、内陷不能切片：含脂较多的〗组织，通常脱水不佳。可将蜡块置于70℃左右的熔蜡中再浸1～3 h，时间长短根据经验控制▅，简便快捷、效果好。(4)蜡片卷曲，连〓切时不能牵拉：一般是切片刀与蜡块的角度不合适、刀刃不够锋利♂或在夏天气温高时也容易发生此种情况。切片刀与蜡块的角度因切片刀刃开的大小而不同，一般在15～25°之间为宜。在夏季包埋好的蜡块最╱好要在冰箱中冷冻后再进行切片。(5)切片有刀痕、裂痕：可能是切片刀有缺口、组织内有钙∞化点、骨片、丝线或者是纸纤维等。解决方法：更换好刀刃、化▂掉问题蜡块剔除钙化、丝线等杂物，重新包埋切片。(6)对于血块、脱钙后的骨组织、发干发→脆的甲状腺、淋巴结、皮肤等组╲织，最好在载玻片上涂抹蛋白甘油后再捞片附贴，防止在染片时发生脱片现象。

1．5 展片、捞片和烤片】

1．5．1 展片的水温 一般在45～50℃之间，这与包埋用蜡的熔点相关，水温过高切片组织周围石蜡快速融化，不易展片∏且捞片时易产生小气泡。

1．5．2 捞片位置 在切片〒平展无皱褶时，再用干净的载玻片捞片，捞片一定要Ψ注意切片贴附的位置，在玻片中1／3和下1／3的中间 。

1．5．3 烤片的方法 多种多样，可根据实际情况灵活选取。一般65℃的温箱内30min左右即可，时间过长或温度过高，细胞收缩，染色不佳；时间太短或温◥度较低，极易造成脱片。

1．6 染色

1．6．1 切片染色时要关注的问题和预防处理的方法 (1)脱蜡要彻底：切片染色卐不均或出现片状毛玻璃样，往往是脱蜡不彻底造成的。预防处理的方法是：烤好的片子♀一般经过2～3道二甲苯脱蜡，以三道二甲苯为例，所用的二甲苯可由前至后依序更换，更换第一∏道时，二、三道前移一个位◆置，第一道置于第三位置并加上新液。更换依据，每500 ml液体，第一道处理500张片子，第二□道处理¤¤700张片子，第三道处理l000张片子。(2)染色时间要适当：片子在苏木︻精染液中染色时间是根据染料的新旧程度、温度、切片的类型呈动态变化。一般3～10 min。我们采用Gill苏木精作为细胞核染液。与既往的Harry苏木精◣相比，配制时勿需加⌒温，配好后即可应用，染色性能也较稳定。(3)分化：是HE染色的关键环∮节，需在显微镜下控制。理想的切片在显微镜下表现是核质红蓝相映、对比明显、核膜及↓核染色质颗粒清晰可见。需要注意的是Ψ 蓝化过程，实践证明使用氨水等碱性溶液促蓝当时效果很好，但切片不能ω长期保存、容易褪色，建议使用自来水充分冲洗蓝化。(4)脱水彻底，切片透明效果才能好。最常见的问题是脱水后的切片进入透明剂后，二甲苯出现白色浑浊现象。原因是无水乙醇纯度不够或含较多水分所致。为了减少乙醇中水分带进二甲苯，在梯度∞乙醇后加了一道正丁醇，不但能↓有效去除水分，而且还兼有透明作用，效果很好。

1．7 封片、黏贴标签

1．7．1 要关注的问题和预防的方法 (1)切片应╳湿封，以防产生细胞收缩，龟裂或出现黑色结晶样小点。(2)封片用的中性树胶要浓度适宜，以树胶均匀充满盖玻片与载卐玻片间隙且∞不外溢为佳。浓度稀会使封片产生气泡、少胶，浓度◆稠会产生胶外溢。(3)封好的切片要达到盖玻片将组织全部覆盖，胶量适宜，不能有气泡和杂质，否则，必须重新返工以达到要求。(4)黏贴标签要位置端正，编码字体清晰。

2、技术室管理中的问题和应对思路

在实际制片工作中，由于环节↑多，人员不固定或配比☉少，部分管理制度不落实或落实不到位，加之技▓术人员与医师之间配合以及经济利益分配等复杂因素，以致使整个临床病理科技术部分管理出现尴尬的“灰色地带”，正确面对这部分⌒工作恰恰是保障临床病理技术室常规出片←前质量控制和管理的关键。

2．1 结合科室的实际情况，定制完备的」质控制度 要求质控的各个细则、目标和责任清晰明了，同时实行奖优惩差，责任到人，做到用︽制度管人。

2．2 高素质技术队伍的精心培养和管理 一切管理中人是决定性的关键因素，如何提高技术人∑　员的自身素质和调动人员的工作主动性、积极性就显得尤为重要。

2．2．1 技术室组长的权责 病理技术室组长应该在病理㊣科领导的授权下负责技术室的全面工作，结合实际工作可对病理技术室内部组织结构的设定、人事安排、财务∩分配等有有决策权。病理科领导只有授予组长这样的权利，才能保证组长在病理技术室中的管理地▼位和权威，才有利于病理技术室工作目标的实现。

2．2．2 重视人才培养，制定培训和再教育计划 (1)加强低年资技术员基本功训练，定期考核。(2)请高年资技术人员或外院技术专家◣授课，提供技术交流平台。(3)派①遣技术人员到高一级医院进修学习，引☆进新技术、新方法。(4)参加地方和全国举办的技术交流会议，开拓视野，增强时代意识。

2．2．3 团队精神 注重技术员和医师、技术员与技术员互相团结、密切配合，把病理技术组的团队作用发挥到极致。

2．3 优化工作流程，严格规范化♀操作 合理的工作流程是全面质ζ量控制的前提，将质量控制的具体措施落实到实际工作的每个环节是全面质◣量控制的根∩本保证和关键所在。

2．3．1 工作流程的进一步优化，实验操作的严格规范是高质量工作目标实现的保障(1)随着大量现代→化病理专业仪器以及计算机信息化系统在病理技术中应用，使不断优化工作流程和人力节省成为可能。(2)工作流程中ぷ涉及的各个环节、均要建立登记记录制度，并以标准化操作要求来自查和评估，并可纳入科室质控管理☆。(3)由于忽然断电、仪器故障、试剂品质等造成组织处理失败，应启动技术室应急预案，并认真【分析事故原因，妥善处置。

2．3．2 落实岗※位责任制，实行责任追究 按照工作流程，合理定岗，由考核小组√每月进行考核评分，实行岗位与津贴挂钩，这样不但增强了工作人员的责任感，同时调动了大家的积极性，而且能最大程度的发挥各工作人员的优点，使整个技术室工作处于高效状↙态。

2．4 自查、评估和改进 病理技术室应定期◤(通常为3个月【或半年)对其工作情况进行自查和评估。评估结果要对比技术室制定的目标进行，主要目的是有针对性↘的不断完善管理，改正工作中存在的不足，提高工作质量。当然，如果目标制定过高，无法实现，也可以对工作目标进行修☆正。

3、结语

多年来的实践表明，系统化管理应用于临床技术室常规出片前√的质量控制及管理▽，效果显著。将制片的全过程归纳到一个系统中去分析，并研究出片前制片流程中所有影响质量的要素，从而进行整体优化，并处理好各项质量环◤节的协调和配合，进而获得规范的工作流程。落实每个环节的岗位责任制，使全面质量控制措施从源头上开▆始执行，从根本上解决了病理标本处理前告知义务不落实、标本取材质量差●、工作流程效率低下、各环节责任不明晰、差错或隐性差错因素多等弊端，保证□　了制片质量，提高了工作效率，杜绝了差错事故的发生，为高质量的临床病理诊断提供了强有力地△保障，得到了患者、同行和医院各临床科室的一致好评。

本文转自《临床与实验病理学杂志》J Clin Exp Pathol--2014Jan；30(1)

---

【本订阅号为非盈利学术交流媒体，所有文章均会标注作者和出处，如有转载文章涉及版权问题，请版权所◎有者及时联系管理人员，我们将第一时」间删除该文章，对已造成的损失，我们深表歉意！】