正确保存的抗体可在较长时间内不发生降解,有效性可延长至几个月甚至几年。相反,未正确保存的抗体可在几个小时内变性,导致实验失败。
1.为保持最大反应性,应按照厂家说明书保存试剂(如,当指定保存温度为2-8℃时,应避免■将抗体置于室温下)。
2.保存抗体的经验法则是将其置于非无霜冰箱/制冷机内的严格密封容器□中,远离组织固定剂和交联试剂。
3.除非加入稳定蛋□ 白,如BSA(1% w/v),否则抗体不得在工→作液中长期保存。避免长期保存稀释的抗体。
4.保存时遇到的主要问题是细菌或真菌污染。如果抗体∑保存在2-8℃超过2-3天,建议进行过滤除菌和/或加◥入抑菌剂/防腐剂,如0.05%叠▓氮化钠或0.1%硫柳汞。
5.叠氮化钠可通过某些偶联方法●干扰多种生物实▼验。因此,进行此类实验时最好使用离≡心透析过滤法、透析法或凝胶过滤法除去∮叠氮化钠,或使用无叠氮化物的抗体。注意:叠氮化◥钠有毒。对于所有实验室试剂,处理注意事项均请查阅“材料安全性数据表∩”(MSDS)。
6.抗体为相对稳定的蛋白,能够抵抗较广范围的温和变性条件。当按照生产商的建议条★件正确保存时,抗体可保持稳▽定达数年※。
7.大多数情况下,抗体保存在-20℃时可不损失其结合能力。
8.最好避免在无霜冰箱中保存抗△体。这是为了避免或尽量减少冻融循环。抗体溶液不可反复冻●融,因为这可导致抗体聚集,从而引起活性丧失。因此,贮存溶液应在保存前先进行分装。
9.未稀释抗体应在保存于-20℃之前分装,以尽量◥减少可使抗体变性的反复冻融循环。集中保存抗体可预防或尽量减少降解。可在抗体溶液中加入终浓度为50%的冷↘冻保护剂,如甘油,以预防冻融造成的》损失。请勿将含甘油的抗体保存于-80℃。
10.通常不对酶结合抗体进▃行冷冻,以免损失酶活性及其结合能力。最好将ξ其保存于+4℃。抗体上的荧光素较易感光淬灭。因此,荧光结合抗体应在深色瓶中避光保存。
11.长期保存时,某些抗体溶液可能产生不溶的成分。沉淀物可〓通过10000 g快速离心去︽除。